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总糖含量测试盒(可见分光光度法)图片
产品货号:
SK184-2
中文名称:
总糖含量测试盒(可见分光光度法)
英文名称:
产品规格:
50管/48样
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖也可称为碳水化合物,包括可溶性的单糖,二糖以及不溶性的淀粉,纤维素,几丁质等。


总糖酸水解为还原糖,在NaOH和丙三醇存在下,DNS试剂与还原糖共热后被还原成氨基化合物,在过量的NaOH碱性溶液中呈桔红色,在540nm处有最大吸收峰,以此测定样品中的总糖含量。


组分规格
试剂一50mL
试剂二50mL
试剂三5mL

保存:4℃,避光


可见分光光度计、沸水浴、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、蒸馏水。


一、样品中总糖的提取:
  • 组织:称取约0.1g样品,加入1mL试剂一,1.5mL蒸馏水,匀浆,95℃水浴中加热30min,加入1mL试剂二,混匀,用蒸馏水定容至10mL,8000g 25℃离心10min,取上清液待测。
  • 液体样本:取0.1mL样本,加入1mL试剂一,1.5mL蒸馏水,匀浆,95℃水浴中加热30min,加入1mL试剂二,8000g 25℃离心10min,取上清液待测。(注意稀释,见注意事项)


二、测定步骤:
  • 分光光度计预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。
  • 调节水浴锅至95度。
  • 加样表:
    试剂(μL)空白管测定管
    样本40
    蒸馏水8040
    试剂三6060
    混匀,置95度水浴中10min(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温
    蒸馏水860860
    混匀,540nm测定吸光值,ΔA=A测定管-A空白管

    注意:
    • 空白管只要做一管。
    • 如果ΔA大于2,需要将上清液用蒸馏水稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数。


三、总糖含量计算:
  • 标准条件下测定的回归方程为y = 0.4503x - 0.0507;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。
  • 按样本鲜重计算:
    总糖(mg/g鲜重)= [(ΔA+0.0507)÷0.4503×V1]÷(W×V1÷V2)×稀释倍数=22.207×(ΔA+0.0507)÷W×稀释倍数。
  • 按样本蛋白浓度计算:
    总糖(mg/mg prot)=[(ΔA+0.0507)÷0.4503×V1]÷(V1×Cpr)×稀释倍数=2.2207×(ΔA+0.0507)÷Cpr×稀释倍数。
  • 按照液体体积计算:
    总糖(mg/mL)=[(ΔA+0.0507)÷0.4503×V1]÷[V3×V1÷(V2+V3)]×稀释倍数=79.95×(ΔA+0.0507)×稀释倍数。

V1:加入样本体积,0.04mL;
V2:加入提取液体积,10mL/3.5mL;
V3:液体样本,0.1mL;
Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;
W:样本鲜重,g。
注意:最低检测限为1mg/g鲜重或10ng/mg prot
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